Överlevnad underlättas genom att låta celler fästa [19, 20], odla holmar på eller inuti fasta ECM-proteinställningar [10, 21-23] och täcka holmar med ECM-proteiner före transplantation [15, 24]. Men ECM ensam kanske inte räcker för att främja överlevnad. Här tillämpar vi ett longitudinellt tillvägagångssätt och högupplöst bildbehandling för att studera dynamiken i processen med engraftment av bukspottskörteln upp till 11 månader efter transplantation.
För den aktuella studien använde vi den främre musögonkameran eftersom den är väl lämpad för att studera biologi och revaskularisering av mänskliga öceller och mänsklig revaskularisering på grund av hornhinnans transparens och dess höga potential att utföra kontinuerliga upprepade inspelningar på enskilda islet transplantat [25-27]. Dessa möss korsades med B6.
Rose är en mus tomat. Rosa-Tomatmöss genererades av hastigheten på medfödd spin B6. Slutligen, keven. CG-TYRC-2J-TG. NG2 - dsred möss. Alla djur uppföddes och underhålls i en viss patogenfri miljö i djuranläggningar vid Lunds universitet. Isolering av öar, transplantation av den främre okulära kammaren och in vivo-avbildning, isolering av möss och transplantation i den främre kammaren hos kvinnliga ögon i 6-8 veckor av B6-Albino eller B6.
Rosa-Tomatmöss utfördes som beskrivits tidigare [26]. 3D in vivo bildanalys av tre till fem slumpmässigt utvalda öar per musöga utfördes med iMaris 9.
En sex-till åtta veckors mottagare B6 njurtransplantationsmodell. Suspensionen av ön 30 xnxl injicerades mellan kapseln och njurparenkymen i vänster njure med hjälp av en trubbig kanyl ansluten till en spruta av Gastik Hamilton, Reno, NV, USA, som beskrivits tidigare [30]. Digitala bilder av kryosektioner installerade med ett fluorescerande medium från Dako, Glostrup, Danmark, erhölls med hjälp av ett Zeiss LSM konfokalt laserskanningsmikroskop.
Bonferroni-korrigering utfördes på tester på parade prover. Därav, vi har använt icke-parametriska metoder sedan provstorlekar i. Resultat revaskulariserade ötransplantat regenererar en ECM-kapsel som liknar Peri-öarnas basmembran. Isletbasalmembran är en känslig biomarkör för öskador som orsakas av enzymatisk isolering och öreparation efter transplantation. Som förväntat visade mänskliga och musöar efter isolering och före transplantation lätt färgning av laminin på periferin av öarna, vilket indikerar fullständig nedbrytning av basalmembranet på öarna med något kvarvarande intracellulärt vaskulärt membran på öarna.
Några dagar efter kulturen. För att studera hur ECM-proteinställningen återställs under transplantation transplanterades pankreasöar av humana organdonatorer eller syngena musdonatorer i den främre okulära kammaren hos mottagarmöss [25]. Några veckor efter transplantationen visade delar av ötransplantat att ytan är som en människa, Fig., Liknar kapseln i bukspottkörtelöarna in situ, revaskulariserade öar i fästningen av betacellmatrisen i den främre okulära kammaren med basmembran inklusive kollagen IV Fig.
Det är känt att basalmembranet av periklider är biokemiskt annorlunda än vaskulära basalmembran [31-33], och möss innehåller lamininer såsom xnx1-kedjor, FIG. Däremot innehåller vaskulära basmembran både XVI 5 och XVI 1 lamininkedjor. Intressant, i det mänskliga basalmembranet, även om alla huvudkomponenter sammanfaller med musen, kan ytterligare laminin xnx5-kedjor hittas i Fig. Det upptäcktes i en ny fördelning av endotelceller och ECM-proteiner i de basala membranen på öarna efter transplantation i det främre ögat hos mottagande möss.
Den gemensamma lokaliseringen ser ut som vit. Kryosektioner immunprovocerades för kollagen IV E-G, Nidogen - 2 H-J, lamininkedja XVI 1 XVI 1 LAM; K-m, Perlecan N-P, kollagen i Q - s och lamininkedja XVI 5 XVI 5 LAM; t - v. DAPI grå färgning indikerar könsceller. Pilarna indikerar könsceller som var externa eller i ett regenererat ECM-Peri-Islet-ark.
Skala stavar, 50 mikron A-D eller 20 mikron E - V. För att undersöka ursprunget för dessa celler använde vi en transplantationsmodell där antingen alla celler i givaröarna är FIG. Rose-tomat donator öar beredda i den främre okulära kammaren av B6-Albino mottagare möss visade stark röd fluorescens in vivo. Även om mindre ofta observeras i teckensnittet av kapsel B6. Rosa - tomatmottagare möss in situ Fig.
Dessutom gjordes liknande observationer i den allmänt använda njursötransplantationsmodellen Fig. De nyligen transplanterade öarna av mus och mänskligt ursprung inkapslas gradvis med hjälp av ECM-producerande celler av mottagarursprung. Rose-tomat holmar transplanteras in i den främre kammaren av okulär eus av mottagare möss B6-Albino A-D eller in situ i bukspottkörteln e eller B6-Albino B6 öarna F, H, I, J, O eller humana holmar G, K, L, P - R transplanteras in i det främre ögat B6.
Rose-Tomatölen, som visas i B, erhållen med användning av tvåfotonmikroskopi. Membranfluorescens av MT-tomat används för att visualisera donatorspecifika öceller i rött. Rosa - tomat bukspottkörteln E, ögon B6. Rose - tomat behandlade möss, förseglade h transplantationer. Det icke-parametriska Friedman-testet användes för att kontrollera allmänna skillnader, och de parade värdena testades med det icke-parametriska Wilcoxon-testet med Bonferroni-korrigering.
Skalstänger, 50 mikron C-H, J, L, M, P eller 10 mikron N, O, Q, R. Senare processen för inkapsling av syngenerationella transplantationer av mus holmar etablerade över 8 månader, lämnar större holmar ytor som finns i Fig. Tvärtom, från 2 månader till 10 månader expanderade den yttre kapseln som erhölls i cellerna och fördelades i förhållande till de mänskliga öarna med öar.
Slingdispersionsmönstret Fig. För att testa om dessa femton kunde återspegla invaginationen av basmembranet i kringutrustningen tillsammans med de injicerande blodkärlen utfördes en mer detaljerad 3D-segmenteringsanalys som visade att hålen i kapseln som producerades i värdcellerna inte var direkt relaterade till de växande blodkärlen i ESM fig. Rose-tomatpankreas eller ögon transplanterade med humanö eller mustransplantationer 3-5 månader efter transplantation Fig.
Frånvaron av X-glattmuskel-aktinuttryck av aSMA utesluter dem från myofibroblaster Fig. De var också negativa för CD31, och markören var markör c för släta pericytmuskler och vaskulära släta muskler 2 NG2 Fig. Denna cellpopulation kan också identifieras i samband med Peri-Isle-kapseln In Situ. Delta i regenerering av det peri-isletliknande källarmembranet i de transplanterade öarna och är anslutet till källarmembranet i peri-teckensnitten i bukspottkörteln.
Mottagarens kryosektioner nickar. Gul indikerar gemensam lokalisering. Se även ESM Fig. Skalstänger, 20 mikron, eftersom både fibroblaster och pericyter är spindelformade ECM-celler med mesenkymalt ursprung, vilket kanske visar en viss grad av plasticitet [34, 35], analyserade vi sedan de transplanterade öarna i den främre oculus. Avdelning B6. NG2 - Dsred Reporter möss.
Som visas i Fig. B6-Albino-Albino holmar transplanterades in i den främre okulära kammaren B6. Skala, 50 mikron.
I enlighet med tidigare data [25] expanderade musöarna under hela studien Fig. De mänskliga öarna som har fallit har nått medianen betydligt mindre. Ett kammartransplantat. Analys av övolym A-D och analys av kärlvolym E-H I transplanterade MUS A, B, E, F eller humana ötransplantationer C, D, G, H, upprepade gånger visas med tvåfotonmikroskopi i 10 månader efter transplantation.
Öarnas volymanalys för musöarna a eller mänskliga öar C baseras på backscattering light och normaliseras till den ursprungliga volymen i Vecka 1 eller vecka 2C.
Representativa bilder visar bilder av en musmottagare som transplanterats med holmar fästa vid iris och utsprång med maximal MIPS-intensitet från en ljusgrå Öbakspridning vid vecka 1 och månad 8 B och vecka 2 och månad 10 D. Biochim Biophys Acta. Könsskillnader i uttrycket av apolipoprotein D vid åldrande och vid Alzheimers sjukdom. Neurobiol åldrande. Förhöjda nivåer av CNS apolipoprotein D hos schizofrena och bipolära ämnen: konsekvenser för patofysiologin av psykiska störningar.
Förändrat uttryck av apolipoprotein D i hjärnan hos patienter med Alzheimers sjukdom. J Neurosci Res.J Neural trans. Expression av apolipoprotein D i nigra-substansen av Parkinsons sjukdom. Histol histopatol. En ökning av placenta apolipoprotein D som en anpassning till mänsklig graviditetsdiabetes. Apolipoprotein D är förhöjt i oligodendrocyter i området peri-infarkt efter en experimentell stroke: påverkan av en berikad miljö.
J Cereb Metab. Ökat uttryck av apolipoprotein D efter experimentell traumatisk hjärnskada. J Neurokemi. Samband mellan polymorfismer i apolipoprotein D-genen och sporadisk Alzheimers sjukdom. Brain Res. Apolipoprotein D är involverat i mekanismer som reglerar skydd mot oxidativ stress. Cell åldrande. Selektiv reduktion av hydroperoxikosatetraensyror till deras hydroxiderivat med apolipoprotein D: konsekvenser för lipidantioxidantaktivitet och Alzheimers sjukdom.
Biokemisk J. Sigma-1-receptor: roller i neuronal plasticitet och sjukdomar. Neurosci trender. Sigma - 1-receptorn ökar hjärnans plasticitet och funktionell återhämtning efter en experimentell stroke.Förening mellan polymorfismer i Sigma typ 1-genen och schizofreni. Neurosci Lett. Funktionella polymorfismer i sigma1-receptorgenen associerad med alkoholism.
Biol psykiatri. Förhållandet mellan en variant av Sigma-1-receptorgenen och Alzheimers sjukdom. Lunds Strokeregister: sjukhusschemat och utbytet av olika screeningmetoder för den första stroke någonsin.